河tun毒素（TTX）是一種由河tun等海洋生物產(chǎn)生的高毒性神經(jīng)毒素，廣泛存在于河tun等水產(chǎn)品及相關制品中。該毒素性質(zhì)穩(wěn)定，普通加工方式無法將其破壞，具有ji強毒性且致死劑量極低，是食品安全與質(zhì)量控制領域的重要檢測指標。由于河tun毒素本身無強熒光特性，檢測靈敏度較低，難以直接通過液相色譜儀實現(xiàn)痕量定量分析需求。

本方案依據(jù)國家標準GB 5009.206-2016 第三法 液相色譜-熒光檢測法，采用柱后衍生-高效液相色譜-熒光檢測法，通過免疫親和柱對樣品進行前處理凈化，再結合強堿性在線衍生技術，將無熒光特性的TTX轉(zhuǎn)化為強熒光衍生物，大幅提升檢測的靈敏度與特異性。該方案適用于水產(chǎn)品、水產(chǎn)加工品等多種基質(zhì)的批量檢測，可為食品安全風險監(jiān)測、質(zhì)量管控及合規(guī)放行提供精準、可靠的技術支撐。

1. 檢測原理

TTX本身無強熒光，無法直接檢測；TTX在強堿、加熱下發(fā)生開環(huán)/結構重排，生成具有強熒光的衍生物，再通過熒光檢測器實現(xiàn)精準定性定量。

2. 儀器方法

2.1 液相方法

色譜柱：Pribolab®河tun毒素衍生專用色譜柱（貨號:EH04083）

流動相：Pribolab®河tun毒素衍生試劑包（貨號:DERE007）

柱溫：30℃

檢測波長：激發(fā)波長：385nm；發(fā)射波長：505nm。

進樣量：40μL

流速：1.0 mL/min

2.2 衍生方法

衍生試劑：Pribolab®河tun毒素衍生試劑包（貨號:DERE007）

衍生溫度：110℃

流    速：0.5 mL/min

3. 檢測結果

3.1 線性

分別精密吸取0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL濃度的TTX對照品溶液，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

3.2重復性

取濃度為 0.5 μg/mL 的TTX標準品溶液，連續(xù)進樣 6 針，記錄各針峰面積與保留時間。結果顯示，6 針檢測的TTX峰面積相對標準偏差（RSD）為 1.70%，符合檢測方法學要求。