一、檢測(cè)不難，難的是“樣品怎么處理干凈"

很多做食品檢測(cè)的人轉(zhuǎn)到海產(chǎn)品檢測(cè)時(shí)，第一反應(yīng)是“方法跟做農(nóng)殘差不多"。但其實(shí)海洋生物毒素檢測(cè)中最棘手的不是上機(jī)那一步，而是前處理。

海洋生物樣品基質(zhì)類型多樣，不同基質(zhì)的前處理路徑、提取溶劑體系、凈化柱選擇、pH要求wan全不同。把貝肉的處理方法直接套到魚肉上，把PSP的提取方法用在DSP上，最后回收率會(huì)慘不忍睹。

二、不同樣品基質(zhì)的處理差異

貝類組織（牡蠣、蛤、貽貝、扇貝） ：這是貝類毒素檢測(cè)中最常見的樣品類型。GB 5009.213-2016明確要求取貝肉收集約200g瀝水5min后均質(zhì)。貝類不同組織的毒素富集濃度差異很大——消化腺中的毒素含量往往是閉殼肌的幾倍甚至幾十倍。如果只測(cè)閉殼肌而忽略了消化腺，可能導(dǎo)致整體毒素嚴(yán)重低估。出口產(chǎn)品或仲裁檢測(cè)建議分組織部位分別測(cè)定-。

貝肉基質(zhì)在處理中最大的問(wèn)題是：蛋白質(zhì)含量高導(dǎo)致提取液粘稠、過(guò)柱易堵、回收率不穩(wěn)定。處理要領(lǐng)是提取后必須充分離心，取中層清液；必要時(shí)用正己烷輔助除脂；上SPE柱前用0.45μm濾膜預(yù)過(guò)濾。

魚肉樣品：河鲀毒素主要蓄積在河豚魚的肝臟、卵巢、皮膚和腸道中，肌肉中的毒素含量相對(duì)較低。鮮河豚魚中TTX的測(cè)定已有國(guó)標(biāo)方法，檢出限0.1μg/L-。魚肉樣品處理需注意均質(zhì)要充分、取樣要有代表性，不能只測(cè)肌肉。

藻類和水樣：藻類是海洋毒素的“源頭"——有毒藻類通過(guò)食物鏈將毒素傳遞給貝類和魚類。藍(lán)藻產(chǎn)生的微囊藻毒素在淡水水體和海產(chǎn)品中均有檢出可能。水體樣品中海洋毒素濃度通常極低，需要大體積富集——可通過(guò)SPE柱或免疫親和柱對(duì)水樣進(jìn)行大體積上樣富集，再洗脫檢測(cè)。藻類樣品則需先進(jìn)行細(xì)胞破碎（超聲或凍融法），充分釋放胞內(nèi)毒素后再提取。

三、不同毒素的前處理pH要求——用錯(cuò)了整個(gè)方法都廢了

這是很多新手翻車最多的地方：

·

麻痹性貝毒（PSP）：提取需在酸性條件下進(jìn)行（0.1mol/L鹽酸），酸性環(huán)境有助于STX及其衍生物從貝類組織中釋放并保持穩(wěn)定。

·

·

腹瀉性貝毒（DSP）：提取需在中性或弱堿性條件下，岡田酸和鰭藻毒素在酸性條件下容易降解。

·

·

失憶性貝毒（ASP）：軟骨藻酸為水溶性毒素，提取以甲醇-水（50:50）體系為主，經(jīng)陰離子交換柱凈化，不需要特殊的酸堿調(diào)節(jié)-。

·

·

神經(jīng)性貝毒（NSP）：目前國(guó)標(biāo)為小鼠生物法，前處理以丙酮提取為主-。

·

·

河鲀毒素（TTX）：水溶性，酸性條件提?。?.1%乙酸-甲醇溶液），需SPE柱凈化后上機(jī)。

·

如果你的實(shí)驗(yàn)室同時(shí)做多種海洋毒素檢測(cè)，記住這條原則——不同毒素類型、不同提取體系、不同pH要求、不同凈化柱，一定分開處理，不能混用。如果你在同一批樣品中既要做PSP又要做DSP，那就老老實(shí)實(shí)走兩條不同的前處理路線，沒(méi)法“一鍋出"。

四、多毒素同時(shí)檢測(cè)的趨勢(shì)與挑戰(zhàn)

目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的海洋毒素檢測(cè)還是“單毒素逐個(gè)分析"——PSP做一批、DSP再做一批、ASP又做一批。但近年來(lái)LC-MS/MS多毒素同時(shí)檢測(cè)技術(shù)日趨成熟，已有方法可同時(shí)檢測(cè)貝類中7種以上的真菌毒素和貝類毒素，省時(shí)省力、通量更高。

多毒素聯(lián)檢面臨的核心挑戰(zhàn)有三個(gè)：不同毒素的提取條件難以wan全統(tǒng)一、不同毒素的離子化效率差異大需要逐個(gè)優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)、不同毒素的標(biāo)準(zhǔn)品必須齊全且基質(zhì)匹配的質(zhì)控樣品必須同步配齊。這也是為什么市場(chǎng)上能提供多毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品和配套質(zhì)控樣品的供應(yīng)商并不多——這需要深厚的方法開發(fā)積累和齊全的產(chǎn)品矩陣。

五、普瑞邦多毒素檢測(cè)產(chǎn)品方案

普瑞邦（Pribolab）在海洋生物毒素標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)試劑方面提供了較為完整的產(chǎn)品組合：

多毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品系列：提供Mix201 8種海洋毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品、Mix202 9種海洋毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品、Mix203 4種海洋毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品、Mix204 10種海洋毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品、Mix205 15種海洋毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品，涵蓋麻痹性貝毒、腹瀉性貝毒、失憶性貝毒、神經(jīng)性貝毒及河鲀毒素等多種毒素的混合標(biāo)準(zhǔn)品，滿足HPLC和LC-MS/MS多毒素同時(shí)分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線建立需求-65。

ELISA快速篩查試劑盒：覆蓋麻痹性貝類毒素（PSP）、腹瀉性貝類毒素（DSP）、神經(jīng)性貝類毒素（NSP）、記憶缺失性貝類毒素（ASP）、河tun毒素（TTX）和微囊藻毒素（MC）六大類，具有靈敏度高、前處理簡(jiǎn)單、適合大批量樣品快速篩查的特點(diǎn)。

基體質(zhì)控樣品：提供菲律賓蛤仔肉、蛤蜊肉、櫛孔扇貝肉、長(zhǎng)牡蠣肉、紫貽貝組織等多種真實(shí)貝類基質(zhì)的質(zhì)控樣品，覆蓋大田軟海綿酸（OA）和鰭藻毒素（DTX-1）等腹瀉性貝類毒素核心指標(biāo)，滿足方法驗(yàn)證、能力驗(yàn)證和日常質(zhì)控需求-70。

海洋生物毒素檢測(cè)，關(guān)鍵不在儀器配置多高，而在前處理是否規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)品是否齊全、質(zhì)控是否到位。普瑞邦作為國(guó)內(nèi)生物毒素檢測(cè)領(lǐng)域產(chǎn)品線較完整的供應(yīng)商之一，可以提供從標(biāo)準(zhǔn)品到試劑盒、從質(zhì)控樣品到技術(shù)支持的完整方案，為海產(chǎn)品安全檢測(cè)體系提供標(biāo)準(zhǔn)化的產(chǎn)品支撐。