伏格列波糖作為臨床常用的α-葡萄糖苷酶抑制劑，對(duì)2型糖尿病患者餐后高血糖的控制作用關(guān)鍵，其原料藥及制劑的有效成分含量、有關(guān)物質(zhì)等指標(biāo)是否達(dá)標(biāo)，直接決定臨床用藥療效與安全性，是藥品質(zhì)量管控的核心要點(diǎn)。

目前伏格列波糖檢測(cè)方法多樣，常見的有高效液相色譜-示差折光法、蒸發(fā)光散射法、柱前衍生法等，不同方法在精準(zhǔn)度、操作便捷性、適用場(chǎng)景上各有特點(diǎn)。青島普瑞邦生物工程有限公司依據(jù)2025版《中華人民共和國藥典》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，特推出柱后衍生-高效液相色譜法專屬解決方案，通過Pribolab MDS-柱后衍生器與HPLC方法聯(lián)用，結(jié)合高碘酸鈉-?；撬嵫苌w系實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè)。

1. 檢測(cè)原理

第一步：氧化反應(yīng)

目標(biāo)物經(jīng)色譜柱分離后進(jìn)入衍生裝置，與衍生試劑中的高碘酸鈉接觸并發(fā)生選擇性氧化反應(yīng)。高碘酸鈉作為強(qiáng)氧化劑，可特異性氧化分子中的羥基，將其轉(zhuǎn)化為高活性羰基，完成分子結(jié)構(gòu)活化。

第二步：縮合反應(yīng)

氧化生成的羰基可與衍生體系中的?；撬峥焖侔l(fā)生縮合反應(yīng)，生成性質(zhì)穩(wěn)定、熒光響應(yīng)強(qiáng)的熒光衍生物。該衍生物適配熒光檢測(cè)器檢測(cè)，且熒光響應(yīng)強(qiáng)度與伏格列波糖濃度具備良好線性關(guān)系，可通過熒光信號(hào)定量計(jì)算樣品中伏格列波糖的含量。

2. 儀器方法

2.1 液相方法

色譜柱：Pribolab®伏格列波糖衍生專用色譜柱（貨號(hào):EH4085）

流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液-乙腈（37：63）

柱溫：35℃

激發(fā)波長(zhǎng)：350nm 發(fā)射波長(zhǎng)：430nm

進(jìn)樣量：50μL

2.2 衍生方法

衍生試劑：Pribolab®伏格列波糖衍生試劑包（貨號(hào):DERE009）

衍生溫度：100℃

3. 檢測(cè)結(jié)果

3.1  線性

分別精密量取濃度為 0.1、1、2、5、10 μg/mL 的對(duì)照品溶液，注入液相色譜儀，記錄各濃度對(duì)應(yīng)的峰面積。以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸。

結(jié)果表明，該物質(zhì)在 0.1~10 μg/mL 濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù) R2 = 0.9995，滿足分析方法對(duì)線性的要求。

3.2 系統(tǒng)適用性的重復(fù)性驗(yàn)證

取伏格列波糖與雜質(zhì)I對(duì)照品、雜質(zhì)II對(duì)照品、雜質(zhì)Ⅲ對(duì)照品各適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中分別約含伏格列波糖1mg及雜質(zhì)I、雜質(zhì)II、雜質(zhì)Ⅲ各10μg的混合溶液，連續(xù)進(jìn)樣 6 針，記錄各針峰面積與保留時(shí)間。結(jié)果顯示，6 針檢測(cè)的伏波列格糖峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.04%，雜質(zhì)I峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.49%，雜質(zhì)II峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.22%，雜質(zhì)Ⅲ峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.99%，符合檢測(cè)方法學(xué)要求。